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产地 | 德国 |
品牌 | QIAGEN |
货号 | |
保存条件 | 2-30度 |
英文名称 | |
CAS编号 | |
保质期 | 1个月 |
简介:
从富含纤维的组织中纯化至多100 µg的总RNA
1. 优化的实验方案,用于富含纤维的组织
2. 总RNA产量高
3. 获得高品质RNA,用于多种下游应用
4. 使用DNase I去除基因组DNA
RNeasyFibrous Tissue Mini Kit包含蛋白酶K和RNeasy离心柱,前者用于去除富含纤维的组织样本中大量的蛋白,后者用于纯化至多100 µg高品质RNA。该试剂盒可在QIAcube全自动核酸纯化仪上实现完全自动化。可使用RNAlater RNAStabilization Reagent或Allprotect Tissue Reagent方便的稳定纤维组织样本,使用TissueRuptor或TissueLyser体系有效地裂解样本。处理更大的样本可使用RNeasyFibrous Tissue Midi Kit(离心柱的结合能力为1 mg RNA)。
详细信息:
性能
RNeasy Fibrous Tissue Kits适用于从纤维丰富组织中提取RNA,RNeasy Fibrous Tissue操作流程能简单有效的提取高品质总RNA,纯化的RNA适用于多种下游应用,包括芯片分析和real-timeRT-PCR。与其他硅胶方法相比,RNeasyFibrous Tissue Mini Kit从纤维丰富组织中提取的RNA产量更高(参见下表)。
与其他硅胶方法相比使用RNeasy Fibrous Tissue Kits具有*的RNA产量
大鼠组织(10 mg) |
使用RNeasy Fibrous |
使用硅胶试剂盒得到的RNA产量*(µg)(供应商AV) |
使用硅胶试剂盒得到的RNA产量*(µg)(供应商R) |
使用硅胶试剂盒得到的RNA产量*(µg)(供应商S) |
心脏 |
8.2 |
3.5 |
<0.5<> |
2.5 |
肌肉 |
5.3 |
0.5 |
2.0† |
2.2 |
皮肤 |
6.0 |
未确定 |
未确定 |
未确定 |
食道 |
13.9 |
未确定 |
未确定 |
未确定 |
根据试剂盒供应商的说明书从组织中纯化的RNA。† 离心柱被阻塞,产生低品质RNA。制备样本中的污染 物可能导致产量被高估。
原理
RNeasy技术具有异硫氰酸胍裂解的严谨性以及硅胶膜纯化的速度和纯度,简化了总RNA的纯化流程。RNeasy Fibrous Tissue Kits适用于处理纤维丰富的组织,例如骨骼肌、心脏和主动脉。因为含有大量的收缩性蛋白、连接组织和胶原蛋白,这些组织非常难裂解。RNeasy Fibrous Tissue操作流程将蛋白酶K和RNase-free DNase消化步骤结合起来,在RNA分离的同时能降解蛋白和基因组DNA,纯化得到的高品质总RNA的产量更高。RNeasy技术适用于大于200 nt的RNA,因此RNA产物不包括5S rRNA、tRNA或其他小分子量RNAs,产物占细胞内总RNA的15–20%。
操作流程
0.5–30 mg纤维组织样本在异硫氰酸胍缓冲液中裂解。裂解液被稀释后,样本经蛋白酶K处理。离心使碎片沉淀。然后加入乙醇使裂解液澄清,之后RNA结合到RNeasy硅胶膜上。在RNeasy离心柱中加入DNase去除残留的DNA。DNase和其他污染物被洗涤后,使用150–500 µl不含RNase的水即可洗脱得到至多100 µg的高品质总RNA。
应用
RNeasy Fibrous Tissue Kits从纤维丰富的样本中纯化得到的高品质总RNA,适用于多种下游应用,包括芯片分析和real-timeRT-PCR。
技术参数
特点 |
参数 |
Applications |
PCR, real-time PCR, microarray |
Elution volume |
30–100 µl |
Format |
Spin column |
Main sample type |
Fibre-rich tissue samples |
Processing |
Manual |
Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein |
RNA |
Sample amount |
0.5–30 mg |
Technology |
Silica technology |
Time per run or per prep |
55 minutes |
Yield |
5–12 µg |
【公司名称】 广州健仑生物科技有限公司
【联 系 人】 全国东
【公司
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