七项呼吸道病原体核酸联合检测试剂盒

甲型（A型）流感病毒是一种具有较强传染性的流感病毒类型，易引发流行
乙型（B型）流感病毒同样属于流感病毒范畴，不过其传播范围和影响力相对甲型而言稍弱一些
呼吸道合胞病毒主要会对呼吸道造成侵害，引发呼吸道方面的疾病
腺病毒的类型较多，可引起多种病症，像呼吸道感染、眼部感染等

副流感病毒包含1型、2型和3型，它们也是导致呼吸道疾病的常见病原体。
【包装规格】 鉴定试剂：80 T/盒
【预期用途】 用于定性检测 7 种呼吸道病毒：甲型（A 型）流感病毒，乙型（B 型）流感病毒，呼吸道合胞病毒， 腺病毒，副流感病毒 1、2 和 3 型。
【检验原理】 荧光素（FITC）标记的单克隆抗体与病毒抗原结合，形成稳定的抗原-抗体复合物，在荧光显微镜下观 察，呈现特异性绿色荧光。
【储存条件及有效期】 2oC-8oC 避光保存 18 个月。
【适用仪器】 荧光显微镜，激发波长 490 nm，发射波长 520 nm。
【样本要求】 鼻咽部取样后保存于生理盐水中，应在 24 小时内送检。
【检验方法】
1、取样：用鼻咽拭子从鼻咽部取样或者使用鼻腔灌洗液，将鼻咽拭子放入储存管中（含有生理盐水）。
2、样本准备步骤：
①将样本充分震荡混匀约 10-15 秒。
②在 400-600xg 转速下离心 5-10 分钟。
③弃上清。
④在沉淀中加 2-3 mL PBS 缓冲液（不能使用试剂盒中的浓缩洗液），充分震荡混匀约 10-15 秒。
⑤在 400-600xg 转速下离心 5-10 分钟。
⑥吸走上清和黏液层，小心不要吸到沉淀。
⑦重复步骤 4 到 6，直至黏液层被完全去除。
⑧在沉淀中加 0.5-1 mL 的 PBS 缓冲液。
⑨用移液器反复吹吸来重悬细胞沉淀，形成一个略混浊的悬液。
3、直接样本测试步骤：
①在 8 孔板上的孔内滴加 25 μL 的细胞悬浊液，每样本需滴加七孔。
②样本完全风干。
③在 20oC 到 25oC，用预冷的 丙酮固定细胞约 5-10 分钟。
④从丙酮中取出载玻片并风干。
⑤在固定并风干的细胞上，每一孔分别滴加不同的 DFA 鉴定染色试剂，试剂要完全覆盖细胞。
⑥可选步骤：在呼吸道病毒抗原对照板的每孔内滴加相对应的鉴定试剂。抗原对照板包含了被病毒感染的 细胞和未感染的细胞（板上标有 NEG 的孔为阴性对照孔，但滴加的是 DFA 染色试剂（任选一种），检验试剂 是否有假阳性）。
⑦将载玻片放于 35oC 到 37oC 的恒温箱内孵育 15 到 30 分钟，为保持其湿润 放置于带盖的盒子内。
⑧用事先稀释好的洗液（试剂盒中 40X 浓缩洗液）漂洗染色细胞。为了更有效地洗涤，请将玻片在洗液中反复浸蘸 几次。
⑨使用新的稀释洗液再洗一次。
⑩用去离子水再洗一遍。
4、观察实验结果 滴加 2 到 3 滴固定液，并加盖盖玻片，要注意避免产生气泡。在 200 倍放大荧光显微镜下观察结果。
【结果判断】
200 倍显微镜下每视野找到≥2 个绿色荧光细胞即为阳性，否则为阴性。阴性细胞被 Evans Blue 染成红色。