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一、 【产品名称】
通用名称：包虫病IgG抗体检测试剂盒（酶联免疫吸附法）
英文名称：Hydatid Disease IgG Antibody ELISA Kit
二、 【用途】
本试剂盒用于定性或半定量检测人血清或血浆样本中的抗细粒棘球绦虫（Echinococcus granulosus）和多房棘球绦虫（E. multilocularis）IgG抗体。
主要用于包虫病（囊型包虫病和泡型包虫病）的辅助诊断和流行病学调查。
三、 【检验原理】
采用间接酶联免疫吸附法（Indirect ELISA）：
微孔板预包被有纯化的包虫病抗原（通常是细粒棘球蚴抗原或混合抗原）。
将稀释后的待测样本加入微孔中，如果样本中含有抗包虫病IgG抗体，则会与孔内的抗原结合，形成抗原-抗体复合物。
洗板去除未结合的物质。
加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的鼠抗人IgG抗体（酶标二抗），该二抗会与步骤2中结合在板上的IgG抗体特异性结合。
再次洗板，去除未结合的酶标二抗。
加入底物液（TMB），酶催化底物发生显色反应，产生蓝色。
加入终止液（Stop Solution）终止反应，蓝色转变为黄色。
用酶标仪在450nm波长（参比波长630nm）下测定各孔的吸光度（OD值）。OD值的高低与样本中抗包虫病IgG抗体的含量成正比。
四、 【主要组成成分】
预包被微孔板：1板（12条×8孔）
阴性对照：1瓶
阳性对照：1瓶
校准品/临界值对照：1瓶（部分试剂盒提供）
样本稀释液：1瓶
酶结合物（浓缩或即用型）：1瓶
浓缩洗涤液（20×或25×）：1瓶（使用前需用蒸馏水或去离子水稀释）
底物液A、底物液B（TMB）：各1瓶
终止液：1瓶
封板膜：若干
说明书：1份
五、 【样本要求】
样本类型：人血清或血浆（EDTA、肝素钠或枸橼酸钠抗凝）。
样本处理：无溶血、无乳糜、无微生物污染。样本在2-8°C下可保存一周，如需长期保存，应置于-20°C以下，避免反复冻融。检测前需恢复至室温并混匀。
六、 【检验方法】
准备工作：将所有试剂和样本恢复至室温（18-25°C）。按说明书要求配制好工作浓度的洗涤液。
编号：取出所需数量的微孔条，固定在板架上。
稀释加样：
设空白孔1孔（不加任何液体）、阴性对照孔2-3孔、阳性对照孔2-3孔、校准品孔（如有）2孔。
在相应孔中分别加入阴性对照、阳性对照、校准品和用样本稀释液稀释后的待测样本100μL。
空白孔不加任何物质。
孵育：盖上封板膜，置37°C温育30分钟。
洗涤：弃去孔内液体，用洗涤液注满每孔，静置30秒后弃去，重复洗涤5次， 在吸水纸上拍干。
加酶：除空白孔外，每孔加入酶结合物100μL。
孵育：盖上封板膜，置37°C温育30分钟。
洗涤：重复步骤5的洗涤过程。
显色：每孔（包括空白孔）依次加入底物液A、底物液B各50μL，轻轻混匀，37°C避光显色15分钟。
终止：每孔加入终止液50μL，轻轻混匀。
读数：在终止反应后15分钟内，用酶标仪于450nm波长（参考波长630nm）测量各孔的OD值。
七、 【结果判断】
临界值（Cut-off值）的计算方法因试剂盒而异，请务必以所用试剂盒说明书为准。 常见计算方法如下：
计算阴性对照平均OD值（NCX）。
计算临界值（Cut-off Value）：
常见公式：Cut-off = NCX + 0.15 或 Cut-off = 阴性对照均值 × 2.1 或使用校准品值。具体公式见说明书。
结果解释：
阳性（Positive）：样本OD值 ≥ Cut-off值。
阴性（Negative）：样本OD值 < Cut-off值。
*注：部分试剂盒会提供灰区（Equivocal）范围，如样本OD值在Cut-off值的0.9-1.1倍之间，建议隔周复查或用其他方法确认。
八、 【检验方法的局限性】
本试验仅用于检测IgG抗体，感染早期抗体可能未达到检测水平，可能出现假阴性。
与其他寄生虫病（如囊尾蚴病、肝吸虫病等）可能存在交叉反应，导致假阳性。
免疫抑制剂 或免疫功能低下的患者可能产生假阴性结果。
本试剂检测结果仅供临床参考，不能作为包虫病确诊的 依据，必须结合患者的临床症状、影像学检查（如B超、CT）和流行病学史进行综合判断。病原学检查是确诊的金标准。
九、【储存条件及有效期】
未开封试剂盒：2-8℃避光保存，切勿冷冻。
有效期：通常为6-12个月，具体见外包装盒标签。
开封后：已稀释的洗涤液可在2-8℃保存1个月。其他液体组分应根据说明书要求保存和使用。
十、【注意事项】
本品仅用于体外诊断。
操作时必须穿戴防护服、手套，所有样本和试剂均应视为有潜在传染性物质处理。
不同批号、不同品牌的试剂组分不得混用。
请勿使用过期试剂。
严格控制反应温度、时间和洗涤操作，这些因素会严重影响实验结果。
