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钩端螺旋体（Leptospira）试剂盒（酶联免疫吸附试验法）使用说明书
仅供体外研究使用，不用于临床诊断
本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中人钩端螺旋体（Leptospira）的含量。

有效期：6个月

保存条件：2-8℃

[实验原理]

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人钩端螺旋体（Leptospira）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并 洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人钩端螺旋体（Leptospira）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

[样本处理及要求]

1.  血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

2.  血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

3.  组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。

4.  细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

注：标本溶血会影响检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

[需要而未提供的试剂和器材]

1.酶标仪（450nm）

2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.37℃恒温箱

4.蒸馏水或去离子水

[试剂盒组成]

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健仑生物

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钩端螺旋体（Leptospira）简称钩体，种类很多，可分为致病性钩体及非致病性钩体两大类。致病性钩体能引起人及动物的钩端螺旋体病，简称钩体病，是在 各地都广泛流行的一种人畜共患病，中国绝大多数地区都有不同程度的流行，尤以南方各省最为严重，对人民健康危害很大，是中国重点防治的传染病之一。

防治措施

，避免犬与带菌动物(尤其是猪与鼠类)及被其尿所污染的水，饲料接触。被污染的环境，可用2～5%漂白粉溶液，或2%氢氧化钠，或3%来苏儿消毒。

，驱鼠、灭鼠。

第三，严禁饲喂病畜肉及带菌动物的生肉及其他产品。

第四，对较大的犬群每年进行1次检疫，发现病犬及可疑感染犬，应及时隔离。青霉素、链霉素对本病有很好的 ，尤其在早期应用，效果更好。但必须连续 3～5天，才能起到消除肾脏内钩端螺旋体的作用。

第五，采取药物预防。我国尚无犬用钩端螺旋体菌苗，国内外有与其他疫苗结合的多联苗，可给犬预防接种，但菌苗必须包括当地主要流行菌型。如无菌苗，可在流行期间采用药物预防，即在饲料中加入土霉素(每千克饲料加入土霉素0.75～1.5克)或四环素(按1～1.5毫克/千克体重)，连喂7天，可控制犬的感染。

第六，饲养病犬的人员，不要再与健犬接触 。

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健仑生物部分生物试剂——

布鲁*菌IgG抗体ELISA检测试剂盒   
布鲁*菌IgM抗体ELISA检测试剂盒   
包虫病IgG抗体ELISA检测试剂盒       HYDATIDOSIS ELISA IgG
基孔*雅热IgG抗体ELISA检测试剂盒   CHIKUNGUNYA ELISA IgG
基孔*雅热IgM抗体ELISA检测试剂盒   CHIKUNGUNYA ELISA IgM
利什曼原虫IgG/IgM抗体ELISA检测试剂盒  LEISHMANIA ELISA IgG+IgM
麻疹IgG/IgM抗体ELISA检测试剂盒    MEASLES ELISA IgG/IgM
副流感1型IgG/IgM抗体ELISA检测试剂盒  PARAINFLUENZA 1 ELISA IgG/IgM
副流感2型IgG/IgM抗体ELISA检测试剂盒  PARAINFLUENZA 2 ELISA IgG/IgM
副流感3型IgG/IgM抗体ELISA检测试剂盒 PARAINFLUENZA 3 ELISA IgG/IgM
康氏立克次体IgG/IgM抗体ELISA检测试剂盒  RICKETTSIA CONORII ELISA IgG/IgM
梅毒IgG抗体ELISA检测试剂盒   SYPHILIS ELISA IgG
梅毒IgG/IgM抗体ELISA检测试剂盒   SYPHILIS ELISA IgG+IgM
罗斯河病毒RRV/罗斯河热病ELISA检测试剂盒   ROSS RIVER VIRUS ELISA IgG