（胶体金法）

 1 原理及用途

本产品应用竞争抑制胶体金免疫层析的原理制成，用于检测鱼虾组织、水样等样品中的孔雀石绿（Malachite  Green ，MG）。

样本溶液滴入金标微孔后，样本溶液中的孔雀石绿与金标抗体相结合，从而阻止金标抗体与纤维素膜上孔雀石绿偶联物结合。

2 技术指标

2.1样本检测下限       

    孔雀石绿（显性）…………………1ppb（ng/ml）

    孔雀石绿（隐性）…………………2ppb（ng/ml）

3 试剂盒组成

4 需要的器材和试剂

4.1 仪器：均质器 、氮气吹干装置、振荡器、离心机、刻度移液管、天平（感量0.01g）

4.2 微量移液器：单道20μl-200μl，100μl-1000μl

4.3 试剂：乙腈，正己烷

5 样本前处理

5.1 样本处理前须知：

实验器具必须洁净并使用一次性吸头，以避免污染干扰实验结果。

5.2 配液：无

5.3 样本前处理步骤：

5.3.1 水样

1）取60ul待检水样品与60ul复溶液混匀，备用。

5.3.2 鱼虾组织（虾要去头去壳，鱼要去鳞）

1）取5±0.05g去脂肪均质组织样本于50ml离心管中；

2）加入提取剂1溶液4ml，乙腈10ml，将瓶塞盖紧密封，剧烈振荡3分钟；

3）再加入1瓶提取剂2，盖上盖子后剧烈振荡3分钟，室温下4000r/min离心5分钟；

4）移取4ml上清液于15ml离心管中，加入1ml正己烷，混匀后室温下4000r/min离心1分钟；

5）移取15ml离心管中的下层液体3ml于玻璃试管中，加入100ul氧化剂，混匀后在50-60℃条件下用氮气（或空气）吹干；（若管底剩余少于100ul吹不干液体为正常现象，可直接加复溶液，不影响检测结果）

6）加入300ul复溶液到玻璃试管中，溶解残渣，振荡混匀，备用。

6 实验步骤

6.1 撕开检测卡铝箔包装袋，取出试剂板，放于平整、洁净的台面上。

6.2 取已准备好的待测样本溶液120ul加入到金标微孔中，等待反应2分钟后，用滴管吹打至完全溶解孔内紫红色物资，再等待2分钟，吸取孔内所有溶液滴加到加样孔中，加样后开始计时；

6.3 按室温下放置5-8分钟判断结果，30分钟后结果判读无效。

7 结果判断

阴性（-）：在检测窗内，对照线（C）出现紫红色线，检测线（T）显色与对照线一致或更深，表明样本中孔雀石绿残留浓度低于2ppb或无孔雀石绿残留。

阳性（+）：在检测窗内，对照线（C）出现紫红色线，检测线（T）不显色或比对照线浅（备注：5分钟后，T线明显显绿色的可判定为阳性），表明样本中孔雀石绿残留浓度高于2ppb。

无效：在检测窗内，对照线（C）不出现紫红色线。

8 注意事项

8.1 过期或铝箔袋破损的产品，均不可使用。

8.2 检测卡从冰箱中取出时应恢复到室温后打开，打开的检测卡应尽快使用以免受潮后失效。

8.3 不要触摸检测卡中央的白色膜面。

8.4 取液滴管不可混用，以免交叉污染。

8.5 待检样品溶液需清亮、无混浊颗粒、无细菌污染，否则容易导致阻塞、显色不明显等异常现象，从而影响实验结果的判定。

9 贮藏及保存期

储藏条件：试剂盒于2-30℃干燥环境下保存。

保 质 期：该产品有效期为1年，生产日期见包装盒。

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