动物组织总DNA提取试剂盒价格咨询

储存条件 

本试剂盒在室温（15-25 ℃）下可保存一年。

产品特点：

TM Tissue Genomic DNA Extraction Kit 采用独特的疏水膜技术，高效去除组织蛋白等各种干扰物，提取高纯度的 DNA。试剂盒采用独

特的缓冲系统，可从多种不同类型动物组织和细胞中快速速提取基因组DNA。

注意事项：

1. 实验前准备工作：在实验开始前，详细阅读该手册熟悉各步骤，并准备好所有的试剂盒组分，1.5 ml 和 2 ml 灭菌离心管，以及 37 ℃和 65 ℃的温浴条件。

2. KBL1和KW1在低温时可能产生混浊或沉淀，可在37-50℃温浴片刻。

3. Buffer KW 第一次使用前请按瓶上标签加入 50 ml 无水乙醇。每次使用后，请立即拧紧盖子。

操作步骤： 

（一）平衡吸附柱 

1. 取一TM Mini Column 柱装在一个 2 ml 收集管上（已备）。加入 300 μl Buffer KB 平衡液至柱子内，室温 13 000 rpm 离心 1 min，使平

衡液完全流过柱子。弃收集管中的滤液，将空柱套回收集管内。

注意：柱子不平衡，将导致 DNA 产率减少。

（二）样品处理 

2. A. 组织破碎: 可根据不同样品选择以下方法：

1)液氮研磨: 组织直接放入研钵中，加入少量液氮，迅速研磨，待组织变软，再加少量液氮，再研磨，如此三次，按 5-50 mg 组织/1ml 加入 KBL1，

3混匀，静置 2 min, 转入离心管, 13,000 rpm, 常温离心，2 min (低温可能造成KBL1 结晶,应在 50℃下保持 KBL1 溶解状态)。

2) 直接研磨: 对于新鲜的动物组织, 可以按照 5-50 mg 组织/1ml 加入KBL1，直接研磨后,转入离心管, 13,000 rpm 常温离心，2 min。

3) 匀浆：组织样品按每 5-50 mg 组织加入 1 ml KBL1。用电动匀浆器充分匀浆约需 1-2 分钟。匀浆液转入离心管, 13,000 rpm 常温离心，2 min。(效果*，强烈推荐)

B. 裂解细胞：培养贴壁细胞：不须消化，可直接用 KBL1 进行消化、裂解，KBL1 体积按 10 cm2/ml 比例加入； 悬浮细胞可直接收集、裂解，每

1ml KBL1 可裂解 5×106 动物细胞, 裂解液加入后，静至 2min. 转入离心管, 13,000 rpm 常温离心，2 min。

注意：基因组 DNA 的纯度取决于 KBL1 的体积和标本的量，理论上KBL1 的体积越大，标本的量越少， DNA 质量越好！ 不同的组织有不同的*比例，请在正式实验前摸索。 

（三）吸附 

3. 将上清液或裂解液转移到已平衡过的吸附柱內，室温 13 000 rpm 离心 30 s，使裂解液完全流过柱子。保留柱，弃去收集管中的过滤液，将吸附

柱重新放入收集管。注意：1）室温太低可能造成 KBL1 混浊或沉淀，在 37 ℃温浴片刻即可。 2）如混合液体积过大，可以分成数次上柱，每次上样量不要超过 700 

μl。4.（可选）加入 30 μl 浓度为 20-50 μg/ml 的 RNase A 于柱的膜上，37 ℃放置 5-10 min。注意：本试剂盒没有配备 RNase A 溶液。一般来说，这一步没有必要，

因为本试剂盒的纯化柱对 RNA 没有吸附能力。如果实验要求不能残留微量RNA，可采用这一步处理。

(四) 漂洗 

5. 加入 700 μl Buffer KW1，室温 13 000 rpm 离心 30 s，弃去收集管中的过滤液，保留柱。

6. 加入 700 μl Buffer KW，室温 13 000 rpm 离心 30 s，弃去收集管中的过滤液，保留柱。

注意：Buffer KW 在*使用之前必须加入 50 ml 无水乙醇，并置于室

温下保存。

7. （可选）重复用 700 μl 70%乙醇（室温）洗涤柱子。室温 12 000 rpm离心 1 min。

8. 弃收集管中的滤液，将空柱套回 2 ml 收集管内。室温下，*转速或 13 000 rpm 离心 2 min 以甩干柱子基质残余的液体。

注意：此步骤不可省，否则将导致乙醇残留于 DNA 中，影响后续反应。 

(五)洗脱 

9. 把柱子装在一个新的 1.5 ml 离心管上，加入 50 μl 的 KE（可用灭菌的 TE 10 mM Tris-HCl，pH 8.0 或纯水代替，纯水可预先用 NaOH 调 pH 值至 8.0），65 ℃放置 5-10 min，13 000 rpm 离心 1 min 以洗脱 DNA。（也可以将 KE 预热至 65℃，再加至膜上，可以减少放置时间至 1min）

注意：小心加 KE 到柱中吸附膜的中间部位，并确保液体将膜全部覆盖。

10. DNA 可保存于 4 ℃，若长时间保存，可冻存于-20 ℃。

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