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禽流感病毒核酸检测试剂盒
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  • 供货能力:50000
  • 最低订购量:1盒
  • 可销售总数量:5000盒
  • 发布日期: 2017-06-30
  • 更新日期: 2018-09-28
产品详细说明
品牌: 健仑 保质期: 12个月 个月
产地: 广州 英文名称: H5 PCR TSEST
保存条件: -2度以上 货号: JL33501

禽流感核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)


英文名称:Detection Kit for Avian Influenza Virus Subtype H5 RNA (PCR-Fluorescence Probing)

【包装规格】 48 份/盒 (小包装24份/盒,这个订做)



【预期用途】

禽流感( Avian influenza ,AI)是禽流行性感冒的简称,是由正粘病毒科、流感病毒属 A 型流感病毒引起的禽类(家禽或野禽,

亦有部分哺乳动物)的一种传染病。根据禽流感致病力的不同可分为非致病力禽流感(NPAI)、低致病力禽流感(LPAI)和高致病力禽

流感(HPAI)3 种。在我国,高致病性禽流感以 H5N1 亚型为代表,低致病性禽流感以 H9N2 亚型为主型。实现对禽流感病毒的快速检测

有利于疫情监测以及制定有效的预防控制措施。本试剂盒适用于检测样本中禽流感病毒(AIV)H5 亚型核酸,结果仅供研究,不用于

临床诊断。

【检验原理】

本试剂盒基于实时荧光 PCR 技术,选取禽流感病毒(AIV)H5 亚型病毒毒株核酸片断一个相对保守区作为扩增靶区域,设计特异

性引物探针,通过一步法实时荧光 PCR 体系扩增对 AIV H5 亚型进行定性检测。反应体系中除一对特异性引物和一条特异性荧光探针

外,还配以对应的 PCR 反应 Buffer、逆转录酶、Hot-Start Taq 酶、核苷酸单体(dNTPs)、Mg

2+ 等成分,可实现对 AIV H5 亚型核酸

灵敏特异地检测。

【主要组成成分】

组分名称 规格 数量 主要成分

PCR 检测试剂

(大包装,24 反应/盒)

AIV H5 PCR 反应液 A 408μl/管 1 特异性引物、探针、三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液等

AIV H5 PCR 反应液 B 72μl/管 1 热启动 Taq 酶、c-MMLV 酶等

PCR 检测试剂

(大包装,48 反应/盒)

AIV H5 PCR 反应液 A 816μl/管 1 特异性引物、探针、三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液等

AIV H5 PCR 反应液 B 144μl/管 1 热启动 Taq 酶、c-MMLV 酶等

质控品

(适用于大包装 2 种规格)

阴性质控品 400μl/管 1 生理盐水

AIV H5 阳性质控品 400μl/管 1 含目的片段的重组质粒

不同批号试剂盒的以上成分不可以互换使用。

需自备的试剂:核酸提取试剂

质控品说明:阳性质控品为含目的片段的重组质粒,使用时无需进行核酸提取。

【储存条件及有效期】

试剂盒保存于-20±5℃,有效期9 个月。

试剂盒在 37℃可保存72h;试剂在 4℃可保存7天;避免反复冻融,反复冻融次数不超过 7 次;试剂开瓶次数不超过 7 次。运输采用干

冰保持低温,运输时间不应超过 3 天。试剂盒生产日期见产品标签。

【适用仪器】A BI 7500、ABI 7300、LightCycler480 等荧光定量 PCR 仪。

【样本要求】

1. 适用样本类型:咽喉拭子、泄殖腔拭子、肌肉或脏器样本等。

2. 样品采集与前处理(注意无菌操作)

2.1 活禽样品——取咽喉拭子和泄殖腔拭子,或新鲜粪便拭子,具体采集方法如下:

·咽喉拭子,采取时要将拭子深入喉头及上腭裂来回刮3~5次,取咽喉分泌液;

·取泄殖腔拭子时,将拭子深入泄殖腔转一圈沾取粪便;对于易造成损伤的小珍禽,直接用拭子沾取适量新鲜粪便;

·将咽喉拭子和泄殖腔拭子一起放入盛有1.0ml PBS的Eppendoff管中,编号备用。

2.2 内脏或肌肉样品——用无菌镊剪夹取待检样品2.0g于研钵中充分研磨,再加10ml PBS混匀,或置于组织匀浆器中,加入10 ml PBS

匀浆,然后将组织悬液转入无菌Eppendoff管中3,000 rpm离心10 min,取上清液转入Eppendoff管中,编号备用。

同时供应以下试剂(48T/盒):



甲型流感病毒核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

乙型流感病毒核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

丙型流感病毒核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

季节性流感病毒H1亚型核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

季节性流感病毒H3亚型核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

甲型H1N1流感病毒(2009)RNA检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

人感染H7N9禽流感病毒核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

禽流感病毒H5亚型核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

禽流感病毒H7亚型核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

禽流感病毒H9亚型核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

甲型流感病毒H2亚型核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

甲型流感病毒H4亚型核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

甲型流感病毒H6亚型核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

甲型流感病毒H8亚型核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

甲型流感病毒H10亚型核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

甲型流感病毒H11亚型核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

甲型流感病毒H12亚型核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

甲型流感病毒H13亚型核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

甲型流感病毒H14亚型核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

甲型流感病毒H15亚型核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

甲型流感病毒H16亚型核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

甲型流感病毒N1亚型核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

甲型流感病毒N2亚型核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

甲型流感病毒N3亚型核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

甲型流感病毒N4亚型核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

甲型流感病毒N5亚型核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

甲型流感病毒N6亚型核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

甲型流感病毒N7亚型核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

甲型流感病毒N8亚型核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

甲型流感病毒N9亚型核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

禽流感病毒H5N1亚型核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

禽流感病毒H5N2亚型核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

禽流感病毒H10N8亚型核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

乙型流感病毒Victoria谱系核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

乙型流感病毒Yamagata谱系核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

甲型/乙型/甲流H1N1(2009)三通道核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

甲型/乙型流感病毒双通道核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

甲型流感病毒/禽流感病毒H7亚型双通道核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

季节性流感病毒H1/H3分型核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

甲型H1N1流感病毒(2009)/季节性流感病毒H3亚型双通道核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

乙型流感病毒Yamagata和Victoria谱系核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

禽流感病毒H5/H7/H9分型三通道核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

副流感病毒通用型核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

副流感病毒Ⅰ型核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

副流感病毒Ⅱ型核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

副流感病毒Ⅲ型核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

副流感病毒Ⅳ型核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

副流感病毒分型多通道核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

3. 保存与运送

请遵循目前的流感标本采集方案以及标准的流感标本储存、包装和运送标准和相应的国际航空运输协会的规定。

【检验方法】

1.样本处理和核酸提取(样本处理区)

建议取 200μl 液态样本进行核酸提取;组织样本可以研磨液进行提取操作。可采用中山大学达安基因股份有限公司生产的核酸

提取试剂盒,请按照试剂盒说明书进行操作;也可选择其他合适的商业化产品。

本试剂盒中的阴性质控品参与提取,用于对环境进行监控;AIV H5 阳性质控品不参与提取,用于 PCR 检测试剂的质控。

2.PCR 试剂准备(试剂准备区)

从试剂盒中取出 AIV H5 PCR 反应液 A、AIV H5 PCR 反应液 B,室温融化后振荡混匀,8,000rpm 离心数秒后使用。

2.1 H5 反应体系配制

取适量 PCR 反应管,每管加入 AIV H5 PCR 反应液 A 17μl、AIV H5 PCR 反应液 B 3μl(也可根据 PCR 反应用量,计算各组分所需总

量,混匀后分装 20μl 于单个 PCR反应管中);

3.加样(样本制备区)

于上述PCR反应管中分别加入处理后的阴性质控品、待测标本核酸、AIV H5 阳性质控品各5μl,盖紧管盖,8,000rpm 离心数秒后转

移至扩增检测区。

3.2 ABI Prism 7500 仪器设置(ABI 7500 仪器操作为例,ABI 7300 仪器参照此操作及仪器操作手册)

3.2.1 打开“Setup”窗口,按样本对应顺序设置阴性质控(NTC)、阳性质控以及未知样本(Unknown),并在“Sample Name”一栏中设


Start 值可以在 3~15、End 值可设在 5~20,调整阴性对照的扩增曲线平直或低于阈值线),点击 Analysis 自动获得分析结果,在 Report

界面察看结果。

4.质量控制

阴性质控品:扩增曲线无对数增长期;

阳性质控品:扩增曲线有明显对数增长期,且 Ct 值≤32;

以上要求需在同一次实验中同时满足,否则,本次实验无效,需重新进行。

5.结果判定

1. 如果检测样品的扩增曲线无对数增长期或 Ct 值>38,可判样品为禽流感 H5 亚型阴性;

2. 如果检测样品 Ct 值≤38,且曲线有明显的对数增长期,可判样品为禽流感 H5 亚型阳性。

【检测方法的局限性】

样本检测结果和样本收集、处理、运送及保存质量有关,其中任何失误都将会导致假阴性结果。如果样本处理时没有控制好交叉

污染,可能出现假阳性结果。

【产品性能指标】

根据产品分析性能评估结果,本试剂盒的灵敏度为 1.0×10

3 copies/ml。与感染部位相同或感染症状相似的其他病原体(副流感病

毒、新城疫病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒等)无交叉反应。

【注意事项】

1.本产品仅用于体外诊断;

2.实验室管理应严格按照 PCR 基因扩增实验室的管理规范,实验人员必须进行专业培训,实验过程严格分区进行(试剂准备区、标

本制备区、扩增和产物分析区),所用消耗品应灭菌后一次性使用,实验操作的每个阶段使用专用的仪器和设备,各区各阶段用品不

能交叉使用;

3.为试剂和标本准备阶段提供生物安全柜,实验过程中穿工作服,带一次性手套,使用自卸管移液器;

4.试剂使用前要完全解冻,8,000rpm 离心数秒后使用;

5.标本制备区所用过的吸头请打入盛有消毒剂的容器,并与废弃物一起灭菌后方可丢弃;

6.实验完毕用 10%次氯酸或 75%酒精处理工作台和移液器,然后用紫外线灯照射 20-30 分钟;

7.本试剂盒内阳性质控品应视为具有传染性物质,操作和处理均需符合相关法规要求:卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通

用准则》和《医疗废物管理条例》

具体说明请根据以下信息联系我们


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